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Membranas de unión ideales bajas en proteínas

Membranas de unión ideales bajas en proteínas


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Estoy revisando la literatura sobre el tema. Parece que las membranas de PVDF hidrófilas son ideales para la unión de proteínas bajas, pero también parece que la celulosa regenerada es una sustitución adecuada.

Mirando un recurso (http://www.zellnet.com/elispotplatescolumn/)

Cuando se introdujeron las placas de filtro de PVDF, algunos investigadores optaron por utilizar placas de PVDF y algunos continuaron utilizando NC. Las razones para elegir una placa (membrana) sobre la otra son muy variadas y no se abordarán en detalle aquí. El hecho de que algunos laboratorios e investigadores individuales tengan la firme convicción de que una membrana es superior a la otra va en contra de la gran cantidad de experiencia de la transferencia Western: a pesar de algunas diferencias claras en cómo se puede usar cada una de las membranas, esencialmente no hay informes diferencia en términos de sensibilidad de detección o señal a ruido en NC versus PVDF en la aplicación Western Blot. Dicho esto, está claro que las dos membranas y sus propiedades son bastante diferentes.

El ensayo que estoy viendo en particular es la unión de proteínas / nanopartículas a células de mamíferos. Estoy buscando un equilibrio que me permita eliminar las proteínas libres sin ensuciar la membrana y / o matar mis células.


Aparentemente, el poli (óxido de etileno) es un polímero biológicamente interesante, con interacciones proteicas mínimas.

Aparentemente significa que no lo he probado yo mismo, pero mi profesor de polímeros nos lo dijo.

http://www.sigmaaldrich.com/materials-science/material-science-products.html?TablePage=20204110

http://en.wikipedia.org/wiki/Polyethylene_glycol

La nomenclatura parece favorecer al poli (etilenglicol). Prefiero poli (óxido de etileno), porque entonces sé a partir de qué monómero se sintetizó el polímero.


Materiales de filtro de membrana

Los ésteres de celulosa mixtos son una membrana de muy baja unión a proteínas que es ideal para muestras de base acuosa. Las membranas MCE son una excelente opción cuando la máxima recuperación de proteínas en el filtrado es crítica. Los estudios de laboratorio muestran que las membranas MCE se unen menos proteínas que las membranas de PVDF o polisulfona. Cuando se utilizan con un prefiltro de vidrio en la misma carcasa, estas membranas son ideales para la filtración de medios de cultivo de tejidos y muestras biológicas sensibles. El prefiltro aumenta el rendimiento.


Introducción

Los materiales capaces de unir grandes cantidades de proteínas y otras biomoléculas son medios deseables para aplicaciones como la separación y purificación de proteínas, la síntesis de péptidos y los ensayos de diagnóstico de flujo lateral [1], [2], [3], [4], [5] , [6], [7], [8]. Los materiales ideales para estas aplicaciones deben tener propiedades superficiales estables y controlables, combinar una alta afinidad superficial por las proteínas con una gran área superficial, permitir la absorción de fluidos acuosos y ser económicos y fáciles de manejar [5], [6], [7] , [8], [9], [10], [11]. Por ejemplo, una membrana con alta densidad de grupos cargados positivamente sería deseable para la adsorción de ácidos nucleicos, que están cargados negativamente. Los materiales comunes utilizados en estas aplicaciones no son los ideales en varias áreas. Se han empleado materiales inorgánicos, tales como metales y cerámicas, como materiales para aplicaciones de fase sólida, ya que la naturaleza electrónica de estos materiales genera superficies que pueden cargarse fácilmente y, por lo tanto, pueden modificarse fácil y eficazmente. A pesar de tales ventajas, dichos materiales son a menudo costosos como resultado de la escasez natural y / o los costosos procesos de fabricación necesarios para su fabricación.

Los polímeros porosos sintéticos son una alternativa preferida, cuando es aplicable, debido a su bajo costo, procesamiento simple y alta área de superficie. Desafortunadamente, pocos polímeros disponibles comercialmente poseen superficies que contienen funcionalidades químicas deseables en concentraciones que valgan la pena. Los polímeros que tienen las propiedades químicas necesarias, como la nitrocelulosa, el quitosano y los polielectrolitos, a menudo carecen de las propiedades mecánicas y físicas necesarias en las aplicaciones en fase sólida.

El polietileno poroso sinterizado (PPE), por otro lado, tiene muchas ventajas sobre los materiales actuales utilizados en muchas aplicaciones farmacéuticas y biomédicas. El PPE sinterizado se puede fabricar de forma económica con un mayor grado de control sobre propiedades como el tamaño de los poros, la distribución del tamaño de los poros, el volumen de los poros, el área de la superficie y la densidad del material que el que se encuentra en los materiales porosos utilizados actualmente, específicamente la nitrocelulosa, como se muestra en la Fig.1. Además, los PPE se pueden fabricar fácilmente en una amplia gama de geometrías complejas con un bajo grado de variabilidad geométrica. Sin embargo, a pesar de la flexibilidad para controlar las propiedades geométricas y físicas del material polimérico sinterizado, las propiedades químicas intrínsecas del polietileno no proporcionan ninguna funcionalidad reactiva o hidrofilicidad superficial que sea capaz de unir proteínas [12], [13], [14] , [15]. Desafortunadamente, el polietileno sin modificar, dada su composición química hidrófoba, no tiene propiedades superficiales favorables y, por lo tanto, exhibe una pobre capacidad de unión a proteínas.

Existen varios enfoques para la modificación de las membranas de PPE que les otorgarían propiedades de absorción de proteínas y de absorción controlable, estabilidad térmica y ambiental, larga vida útil y un impacto mínimo sobre sus propiedades físicas y mecánicas originales. La modificación química del polietileno sinterizado se logra mediante el uso de plasma de oxígeno reactivo para formar grupos funcionales cargados negativamente en la superficie del polietileno, la adsorción de un polielectrolito cargado positivamente en la superficie del polietileno y, finalmente, la formación de una bicapa de polielectrolito por el adsorción adicional de un polielectrolito cargado negativamente [16], [17], [18], [19], [20], [21], [22], [23], [24], [25], [26] , [27], [28]. La formación de centros altamente cargados dentro de las cadenas poliméricas de polielectrolitos en solución conduce a fuertes interacciones entre polielectrolitos y sólidos con superficies de carga opuesta [17], [18], [19], [23]. Muchas aplicaciones que involucran polielectrolitos, como el tratamiento de agua y el procesamiento de papel, se centran en esta fuerte interacción electrostática y la consiguiente adsorción del polímero en superficies cargadas [20], [21], [22], [23], [24], [25] , [26], [27], [28]. Debido a que la adsorción superficial de los polielectrolitos es de naturaleza electrostática y, por lo tanto, reversible, la afinidad superficial y la estabilidad del polielectrolito dependen en gran medida de muchos parámetros que incluyen el solvente del sistema, el pH del solvente, la carga superficial, la densidad de carga superficial, la carga del polielectrolito y la densidad de carga del polielectrolito. . El cambio de la fuerza iónica de un sistema de este tipo puede provocar un cambio drástico en la carga local de un polielectrolito adsorbido, lo que, a su vez, puede dar como resultado valores de pH locales que son dos unidades diferentes del valor global esperado [29]. Por tanto, los complejos de monocapa de polielectrolito y bicapa de polielectrolito adsorbidos sobre la superficie activada por plasma proporcionan la flexibilidad necesaria para la optimización de las propiedades de la superficie. Por tanto, las características de unión a proteínas de las membranas de PPE sinterizadas químicamente modificadas pueden controlarse en función de todas las variables de modificación de la superficie mencionadas anteriormente.

Los mecanismos que gobiernan las interacciones de las proteínas con las superficies son bastante complejos y, a pesar de la investigación sustancial, todavía no se conocen bien [30], [31], [32], [33], [34], [35]. Sin embargo, generalmente se acepta que las interacciones de una proteína con una superficie consisten en dos procesos distintos que involucran uniones específicas y no específicas. La unión no específica se basa en interacciones hidrofóbicas entre la proteína y la superficie y está relacionada con la hidrofobicidad de la superficie. Durante la adsorción no específica de proteínas, no existe correlación entre la adsorción de proteínas y la orientación de las proteínas en la superficie. Como resultado, las proteínas unidas de forma no específica se orientan aleatoriamente en la superficie y solo aquellas proteínas con la alineación adecuada retienen su actividad. Por otro lado, la adsorción específica implica la orientación preferencial de las proteínas a través de la unión de sitios específicos en la superficie, promoviendo el alineamiento de las proteínas y la retención de la actividad de las proteínas. Por lo tanto, para una aplicación de flujo lateral exitosa, es importante evaluar y controlar no solo la cantidad total de proteína adsorbida, sino también la fracción de moléculas de proteína adsorbidas que retuvieron su actividad cuando se unieron a la superficie [36], [37], [38], [39], [40], [41], [42], [43], [44], [45].

Factores como el pH y la concentración de electrolitos de la solución tienen un impacto considerable sobre la fuerza y ​​los tipos de cargas electrostáticas y, por lo tanto, pueden dar lugar a diferentes interacciones entre proteínas y superficies en diferentes condiciones [36]. Se ha demostrado que la mayor adsorción de proteínas cargadas ocurre cuando la superficie y la proteína tienen cargas opuestas, en particular en superficies modificadas con polímeros [46], [47]. En este estudio, cuantificamos la adsorción de la proteína de inmunoglobulina G (IgG) de cabra a partir de soluciones de diferente pH y fuerza iónica en varias membranas de PPE sinterizadas modificadas con superficies que tienen cargas catiónicas y aniónicas obtenidas mediante la adsorción de polietilenimina (PEI) y ácido poliacrílico. (PAA), respectivamente, mostrada en la Fig. 2. La cantidad total de adsorción de IgG se determinó midiendo la radiación gamma emitida por la proteína radiomarcada con [125 I] -IgG. Al estudiar el impacto del pH y la fuerza iónica en la adsorción de IgG, intentamos caracterizar el papel y la naturaleza de las interacciones electrostáticas involucradas en el proceso de adsorción para comprender mejor cómo estas interacciones fueron influenciadas por la carga y la estructura de los complejos de polielectrolitos inmovilizados en las superficies de las membranas modificadas. .


Cómo elegir el filtro de jeringa correcto es importante para la filtración. En este blog vamos a hablar sobre los materiales de las membranas que se utilizan para fabricar filtros de jeringa. Verifique la compatibilidad química de la membrana del filtro para los líquidos que va a filtrar.

Acetato de celulosa (CA)

El acetato de celulosa es una membrana de muy baja unión a proteínas que es ideal para muestras de base acuosa y muestras biológicas. Es un aglutinante de proteínas más bajo que las membranas de polietersulfona o PVDF, pero tiene una resistencia química menor que la celulosa regenerada (RC). CA es una membrana fuerte mecánica e hidrófila.

Membrana: acetato de celulosa certificado por HPLC
Unión a proteínas: & lt24ug / cm2

  • Usar con: Muestras acuosas
  • No lo use con: Disolventes orgánicos
  • Esterilización: Los filtros de jeringa se pueden esterilizar en autoclave a 125 ° durante 15 minutos.
  • Aplicaciones: Muestras biológicas, filtración de medios de cultivo de tejidos, preparación de muestras acuosas para HPLC

Microfibra de vidrio (GMF)

Los filtros de microfibra de vidrio deben usarse como prefiltro para muestras con un alto contenido de partículas. Las membranas GMF están disponibles con un tamaño de poro más alto que otras membranas y son tolerantes a la mayoría de los solventes.

  • Membrana: Microfibra de vidrio sin aglutinante
  • Usar con: Muestras muy contaminadas
  • No lo use con: Alcohol de bencilo
  • Esterilización: Los filtros de jeringa se pueden esterilizar en autoclave a 125 ° durante 15 minutos.
  • Aplicaciones: Pruebas de disolución, filtración de muestras con alto contenido de partículas, filtración de aire, recuperación de ADN de muestras biológicas

NYLON (NY)

La membrana de nailon tiene una alta resistencia mecánica fuerte, estabilidad química, puede ser tolerada por la mayoría de los solventes orgánicos, extremadamente baja en extraíbles, buena estabilidad térmica (hasta 50 ° C), hidrofílica natural y la mayoría de las características del filtro de solución de agua. Se aplica con mayor frecuencia al filtrado de fase móvil de HPLC de disolvente orgánico común.

  • Membrana: Nylon con certificación HPLC.
  • Usar con: Bases, la mayoría de disolventes HPLC, alcoholes, hidrocarburos aromáticos, THF.
  • No lo use con: Ácidos, hidrocarburos halogenados agresivos, muestras de proteínas (el nailon es un aglutinante alto)
  • Esterilización: Los filtros de jeringa se pueden esterilizar en autoclave a 125 ° durante 15 minutos.
  • Aplicaciones: Filtración de laboratorio general, la mayoría de las muestras de HPLC

Polietersulfona (PES)

La polietersulfona es una membrana hidrófila que tiene una unión a proteínas muy baja y características de alto flujo. También está certificado para cromatografía iónica. La polietersulfona es más resistente al calor que la mayoría de las membranas y se puede utilizar a 100 ° C.

  • Membrana: PES certificado por ICP (polietersulfona)
  • Usar con: Bases fuertes, alcoholes, proteínas, péptidos.
  • No lo use con: ácidos, cetonas, ésteres, hidrocarburos halogenados o aromáticos.
  • Esterilización: Los filtros de jeringa se pueden esterilizar en autoclave a 125 ° durante 15 minutos.
  • Aplicaciones: Cromatografía iónica, filtración de cultivos de tejidos, filtración de proteínas y ácidos nucleicos, líquidos a alta temperatura.

Polipropileno (PP)

Las membranas de polipropileno hidrofílico son químicamente resistentes y adecuadas para una amplia variedad de muestras orgánicas y de base acuosa. Son aglutinantes bajos en proteínas y pueden usarse con ácidos y bases fuertes sin humedecerse previamente.

  • Membrana: Polipropileno hidrofílico
  • Usar con: Ácidos / Bases, análisis HPLC general
  • Resistencia limitada con: MeCl y cloroformo.
  • Esterilización: Los filtros de jeringa se pueden esterilizar en autoclave a 125 ° durante 15 minutos.
  • Aplicaciones: Filtración de muestras biológicas, solventes orgánicos agresivos.

Politetrafluoroetileno (PTFE)

Las membranas de PTFE son químicamente resistentes a casi todos los disolventes, ácidos y bases. La membrana tiene baja extraíbles y buena estabilidad térmica. El PTFE es hidrófobo y requiere humedecimiento previo antes de su uso con disolventes acuosos.

  • Membrana: PTFE certificado HPLC, con soporte de polipropileno
  • Usar con: Disolventes agresivos, ácidos fuertes, alcoholes, bases, aromáticos
  • No lo use con: Muestras acuosas sin prehumedecimiento (causa alta contrapresión)
  • Esterilización: Los filtros de jeringa se pueden esterilizar en autoclave a 125 ° durante 15 minutos.
  • Aplicaciones: Filtración de soluciones orgánicas agresivas o altamente básicas, protectores de transductores.

Difluoruro de polivinilideno (PVDF)

El difluoruro de polivinilideno es una membrana hidrófila adecuada para la mayoría de las filtraciones de muestras biológicas generales. Tiene una amplia compatibilidad química y es un aglutinante bajo en proteínas, por lo que es una buena opción cuando se requiere una alta recuperación de proteínas.

  • Membrana: PVDF con certificación HPLC
  • Usar con: Alcoholes, ácidos débiles, proteínas, péptidos y otras biomoléculas
  • No lo use con: Algunos ácidos, bases, ésteres, éteres o cetonas fuertes.
  • Esterilización: Los filtros de jeringa se pueden esterilizar en autoclave a 125 ° durante 15 minutos.
  • Aplicaciones: Filtración biológica general, filtración de muestras para alta recuperación de proteínas.

Celulosa regenerada (RC)

La celulosa regenerada es una membrana hidrófila resistente a los disolventes. Es un aglutinante de proteínas muy bajo y es ideal para aplicaciones de unión inespecífica baja.Filtración de medios de cultivo de tejidos y filtración de muestras biológicas en general.


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Ensayo de unión al filtro

En bioquímica o química, una de las formas de aprender sobre la interacción entre dos moléculas es determinar la constante de unión, que es un número que describe la proporción de moléculas unidas y no unidas. Esta información revela la afinidad entre las dos moléculas y permite predecir la cantidad unida dada cualquier conjunto de condiciones iniciales.

Para medir una constante de unión, se debe encontrar una manera de medir la cantidad de complejo formado en un rango de concentraciones iniciales. Esto se puede lograr "marcando" una de las especies con una etiqueta fluorescente o, en este caso, radiactiva. El ADN se "marca" mediante la adición de fosfato radiactivo derivado del trifosfato de adenosina.

A ensayo de unión de filtro es una forma sencilla de estudiar rápidamente muchas muestras. Mide las afinidades entre dos moléculas (a menudo proteínas y ADN) utilizando un filtro. El filtro está construido con papel de nitrocelulosa, que tiene carga negativa. Dado que la mayoría de las proteínas tienen una carga neta positiva, el papel de nitrocelulosa es ideal para inmovilizar proteínas. El ADN está cargado negativamente debido a la cadena principal de fosfato y no se "pegará" a la nitrocelulosa por sí solo, sin embargo, cualquier ADN que haya sido unido por proteínas se pegará. La cantidad exacta de ADN "pegado" a la nitrocelulosa se cuantifica midiendo la cantidad de radiactividad en el filtro usando un contador de centelleo.

La proteína y el ADN se mezclan en una serie de tubos de microcentrífuga en los que la cantidad de ADN se mantiene constante, pero la cantidad de proteína aumenta gradualmente. Se permite que estas muestras se equilibren. Después del equilibrio, se rocía un volumen igual de cada tubo en filtros de nitrocelulosa pequeños y redondos que se colocan en una placa de vacío (una superficie plana a la que se aplica vacío desde abajo para succionar el líquido hacia abajo). Toda la proteína se pegará, pero solo la proteína que se ha unido al ADN se registrará en el contador de centelleo.

Ahora, tendrá un número que describe la cantidad de ADN unido para cada concentración de proteína utilizada, esta información se puede trazar en una curva de unión para determinar la constante de unión.

Este ensayo ya no se usa mucho, pero es rápido y simple, y puede brindar mucha información. Se utilizaría para un análisis relativamente detallado de una interacción proteína-ADN particular, por ejemplo.


¿Qué es un filtro de jeringa?

Un filtro de jeringa (a veces llamado filtro de rueda por su forma de rueda) es un cartucho de filtro de membrana de un solo uso, que se coloca con una jeringa para eliminar las impurezas en las soluciones líquidas. Este paso de prefiltración es vital para evitar daños en los instrumentos (por ejemplo, cromatografía líquida, ICP, etc.).

Los filtros de jeringa desechables se utilizan ampliamente en los laboratorios para un filtrado rápido y eficiente, la purificación de materiales o incluso la esterilización de soluciones & lt250mL, para evitar la instalación de filtros Buchner o similares.

Es esencial que se elija la selección correcta de filtros de jeringa para garantizar resultados de prueba confiables y el mejor rendimiento de purificación. Diámetros de membrana, materiales, tamaño de poro, y alojamiento todos afectan la elección correcta. A continuación, analizaremos los factores importantes para ayudarlo a hacer compatible la elección correcta.


2.4.7 Explique cómo se utilizan las vesículas para transportar materiales dentro de una célula entre el retículo endoplásmico rugoso, el aparato de Golgi y la membrana plasmática.

Una vez que las proteínas han sido sintetizadas por los ribosomas, se transportan al retículo endoplásmico rugoso donde pueden modificarse. Las vesículas que transportan la proteína luego brotan del retículo endoplásmico rugoso y se transportan al aparato de Golgi para ser modificadas aún más. Después de esto, las vesículas que llevan la proteína brotan del aparato de Golgi y llevan la proteína a la membrana plasmática. Aquí las vesículas se fusionan con la membrana expulsando su contenido (las proteínas modificadas) fuera de la célula. Luego, la membrana vuelve a su estado original. Este es un proceso llamado exocitosis. La endocitosis es un proceso similar que implica tirar de la membrana plasmática hacia adentro para que se produzca el pellizco de una vesícula de la membrana plasmática y luego esta vesícula pueda llevar su contenido a cualquier parte de la célula.


Membranas para filtración

Se utiliza para análisis de contaminantes en el aire y otras partículas mediante microscopía óptica o electrónica. Los filtros de membrana de policarbonato Isopore & Trade tienen una superficie lisa similar al vidrio para una observación más clara de la muestra. Disponible en una variedad de tamaños de poros / tasas de flujo, diámetros y colores.

Thermo Scientific & trade Nalgene & trade Discos de prefiltro y membrana de Nalgene & trade

Realice análisis de partículas y microbios con estas membranas de filtro. Disponible en varias formas para trabajos de calidad del agua, esterilización en frío o limpieza de muestras.

Fisherbrand & trade membranas de filtro de PTFE

La membrana de PTFE Fisherbrand & trade es un filtro hidrofóbico hecho de politetrafluoretileno laminado con una capa de PP.

Merck Millipore MF-Millipore & trade membranas mixtas de éster de celulosa: tamaño de poro de 1,2 y mum

Utilizado en investigación analítica.

Membranas de filtro de MARCA y comercio

Se utiliza con los controladores de macro pipeta seripettor & trade / QuikSip & trade / accu-jet & trade pro. Las membranas de filtro están disponibles en capacidad de 3 & muL y se suministran en envases tipo blíster.

Sartorius & Trade Midisart & Trade 2000 Filtro de aire de PTFE

Diseñado para un fácil manejo y máxima seguridad en la filtración de aire. El filtro de aire de PTFE Midisart & trade 2000 de Sartorius & trade elimina por completo la penetración de humedad debido a su membrana de PTFE inherentemente hidrófoba reforzada con una gasa de polipropileno. Los conectores de lengüeta de manguera escalonados garantizan una sujeción simple y segura.

Merck Millipore MF-Millipore & trade membranas mixtas de éster de celulosa con rejilla: 0,45 y tamaño de poro mum

Diseñado para una amplia gama de aplicaciones analíticas y de investigación. Las membranas mixtas de éster de celulosa MF-Millipore & trade, de 0,45 y tamaño de poro están disponibles en una variedad de diámetros. Compuesto por membrana de celulosa mixta en color negro o blanco con superficie lisa o cuadriculada.

Filtros de membrana Merck Millipore Durapore & trade PVDF: 0.22 & mu Tamaño de poro

Recomendado cuando la máxima recuperación es importante. Membranas de PVDF Durapore & trade: 0.22 & mu El tamaño de poro proporciona altos índices de flujo y rendimiento, bajo contenido de extraíbles, amplia compatibilidad química y baja unión a proteínas. Disponible en diámetros que van desde 13 mm a 142 mm.

Filtros de membrana Merck Millipore Durapore & trade PVDF: 0,45 & mu Tamaño de poro

Recomendado cuando la máxima recuperación es importante. Membranas de PVDF Durapore & trade: 0.45 & mu El tamaño de poro proporciona altos índices de flujo y rendimiento, pocos extraíbles, amplia compatibilidad química y baja unión a proteínas. Disponible en diámetros que van desde 13 mm a 142 mm.

Discos de drenaje de poliéster Cytiva Whatman & trade

Proporciona una superficie plana para evitar que el filtro se rompa o se rompa. Los discos de drenaje de poliéster Whatman & trade se utilizan para soportar filtros de membrana. Están disponibles en una variedad de diámetros para su uso en una variedad de dispositivos.

Lámina de filtración Merck Millipore Durapore & trade PVDF

Merck Millipore MF-Millipore & trade Membranas mixtas de éster de celulosa: 0,80 y tamaño de poro mum

Diseñado para monitoreo de aire, bioensayos, microbiología láctea, monitoreo de partículas y remoción de partículas. Las membranas de éster de celulosa mixta MF-Millipore & trade, 0,80 y tamaño de poro mínimo están disponibles en una variedad de diámetros. Compuesto por membrana de celulosa mixta en color negro o blanco con superficie lisa o cuadriculada.

DWK Life Sciences DURAN & trade - Filtro de disco de jeringa de repuesto de 0.2 y microm, para juego de ecualización de presión (accesorio de sistema de tapa de conexión GL 45)

Accesorio para sistema de tapa de conexión GL 45 de 2 o 3 puertos

Filtros de membrana de nitrato de celulosa estériles reticulados Sartorius: 0.45 & mum

Asegurar el control de calidad en el filtrado microbiológico. Los filtros de membrana de nitrato de celulosa estériles en cuadrícula de Sartorius, 0.45 & mum, son membranas de un solo paquete con cuadrículas de colores para el recuento de colonias, pruebas de partículas y microscopía. El tamaño de poro de 0.45 & mum se fabrica de acuerdo con ISO 7704. Elija entre dos diámetros y cantidades en una gama de combinaciones de colores de filtro / rejilla.

Cytiva Whatman & trade membranas de policarbonato grabadas en pista de 47 mm Nuclepore & trade

Fabricado a partir de una película de policarbonato de alta calidad y grabado en pistas para lograr una gran precisión en el tamaño de los poros. Las membranas hidrofílicas de policarbonato de 47 mm Nuclepore & trade de Whatman & trade combinan altas velocidades de flujo y resistencia química y térmica con poros bien definidos, lo que las hace adecuadas para microscopía, citología, parasitología y ciertos análisis de aire y oceanografía.

Fisherbrand & trade Membranas de éster de celulosa mixtas Filtro estéril

Fisherbrand & trade Membranas de ésteres de celulosas mixtas Los filtros estériles están compuestos de acetato de celulosa y nitrato de celulosa.

Fisherbrand & trade membranas de polietersulfona

Las membranas de polietersulfona Fisherbrand & trade presentan una estructura de poros altamente asimétrica que ofrece una capacidad de carga eficaz y una alta tasa de flujo.


Filtración y purificación-preparación analítica de muestras

Las decisiones críticas a menudo se basan en los resultados de sus pruebas analíticas. La confianza en esos resultados proviene del uso de productos que han demostrado funcionar como se espera, incluso con muestras tan pequeñas como 25 ul.

Se ha comprobado que los filtros de química analítica MS proporcionan la mejor protección y rendimiento de HPLC. Solo los filtros de jeringa MS están certificados de forma independiente para su uso en equipos de automatización para garantizar el mejor rendimiento.

Para muestras difíciles de filtrar, es mejor usar un producto con un prefiltro de fibra de vidrio sobre la membrana. El filtro de jeringa MS con prefiltro de fibra de vidrio multicapa GF es la mejor opción para muestras extremadamente cargadas de partículas. Nuestros filtros de jeringa tradicionales con membranas de nailon también están disponibles con un prefiltro de fibra de vidrio de una sola capa.

Para una preparación de muestras y una prefiltración consistentes y mejoradas en aplicaciones de biomoléculas, elija un filtro de jeringa MS con membranas PES, CA. Estos dispositivos son excelentes para la preparación de muestras antes de los estudios de purificación, separación y caracterización por HPLC de biomoléculas como péptidos sintéticos, ácidos nucleicos y proteínas recombinantes y nativas.

A medida que las muestras se vuelven más pequeñas y numerosas, la necesidad de nuevos métodos para la preparación de muestras de alto rendimiento ha llevado a Pall a desarrollar nuevos dispositivos de filtración que simplifican y aceleran el proceso de preparación de muestras.

Guías de filtros de membrana


CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES CLAVE

Actualmente, no existe un método estándar para la investigación del impacto del PB en la actividad antimicrobiana de los antibióticos. Numerosos factores experimentales impactan en el PP y, en consecuencia, en la relevancia de los resultados de los distintos modelos reconocidos. Esto podría explicar los resultados algo contradictorios obtenidos de diferentes estudios. Por lo tanto, se deben desarrollar estándares apropiados. En cuanto al desarrollo de un método estandarizado, esperan importantes desafíos. Por ejemplo, sobre la base de la investigación actualmente disponible, no podemos asumir que será posible encontrar medios estándar y condiciones de prueba que sean apropiadas para todos los antibióticos. Por lo tanto, tanto el medio de prueba como el modelo de DP deben evaluarse cuidadosamente para determinar su idoneidad caso por caso.

No obstante, se pueden proponer con confianza algunas recomendaciones generales. Las siguientes recomendaciones generales se basan en el conocimiento actual de PB basado en observaciones experimentales y se recomienda encarecidamente que se consideren para cada modelo empleado.

(i) Se considera obligatoria la medición de PB en el medio experimental, así como la determinación del crecimiento bacteriano en comparación con los medios de crecimiento estándar. Las investigaciones sin determinación de la unión a proteínas deben considerarse altamente especulativas.

(ii) Para modelos animales de PB, es fundamental determinar la unión en esa especie animal.

(iii) Cuando se investiga el PB en humanos, se prefiere fuertemente el uso de suero y albúmina humanos estandarizados y bien caracterizados. La metodología debe indicar si la preparación de albúmina está libre de ácidos grasos o no.

(iv) Para aumentar el poder de un in vitro modelo para detectar el impacto de PB, concentraciones cercanas a la CMI de la cepa investigada y, si la CMI es el punto final, se debe utilizar una serie de diluciones aritméticas.

(v) Deben emplearse bacterias con un crecimiento apropiado y bien definido en el medio seleccionado.

(vi) Cuando los métodos menos sensibles, como la determinación de la CMI, no detectan ningún impacto de la unión a proteínas, estos resultados deben confirmarse con las cepas seleccionadas estudiadas utilizando curvas de muerte del tiempo.

(vii) La unión al equipo (placas, viales) debe investigarse cuando sea apropiado.

(viii) Los fármacos con mayor unión a proteínas suelen mostrar no solo mayores modificaciones de la acción antimicrobiana en presencia de proteínas, sino que también muestran una mayor susceptibilidad a todos los factores que pueden influir en el PB, incluida la selección de proteínas añadidas, pH, electrolitos, temperatura y otros que se han discutido previamente en este documento. Para poder extrapolar datos de varios modelos a en vivo situaciones, los modelos siempre deben intentar imitar las condiciones fisiológicas lo más fielmente posible.


Ver el vídeo: Tipos de UNIONES entre las CÉLULAS (Noviembre 2022).